Monitoramento de agregados e produto de degradação por SEC

O estudo de estabilidade em princípios ativos de medicamentos é uma prática comum dentro da indústria farmacêutica. Desde a aprovação do primeiro anticorpo monoclonal em tratamentos de doenças como neoplasias, imunologia, cardiovasculares, neurologia e doenças infecciosas, o conhecimento da estabilidade dessas proteínas se faz necessário, pois isso afeta a segurança e eficiência do medicamento. A preservação da estrutura molecular e atividade biológica de anticorpos está relacionada com as ligações não-covalentes e covalentes da molécula e podem ser afetadas por fatores ambientais.¹

O ensaio de degradação forçada, exigido por órgãos nacionais e internacionais, é um estudo eficaz para o conhecimento de mecanismos de degradação, identificação e elucidação de produtos de degradação e garantia de estabilidade. Trata-se de uma prática no qual o ativo é submetido, propositalmente, a condições ambientais que forçam a queda do teor do ativo desde estágios iniciais de pesquisa e desenvolvimento, até a aprovação do medicamento para introdução no mercado.¹

Frente ao exposto, a Jasco do Brasil apresenta os resultados obtidos pela análise do ensaio de degradação forçada do medicamento MabThera® (rituximab), empregado para o tratamento de linfoma do tipo não-Hodgkin, por cromatografia de exclusão molecular (SEC), para comparar as alterações na concentração de monômero, agregados e produtos de degradação.¹

Figura 1. Cromatograma do branco (azul) e padrão de proteína (vermelho):
1: Thyrogrobulin (MM 670 kDa), 2: γ-globulins (MM 150 kDa),
3: Ovalbumin (MM: 44.3 kDa), 4: Ribonuclease A (MM: 13.7 kDa),
5: p-aminobenzoic acid (MM 0.137 kDa).

A Tabela 1 mostra o comparativo dos resultados de degradação do anticorpo frente à amostra controle nas condições de oxidação, glicação, deaminação, aquecimento e fotólise (até 1 minuto). Pela avaliação, observa-se um aumento de 0,2 a 0,6% na formação de espécies de alta massa molecular e de 0,1 a 0,4% das espécies de baixa massa molecular, evidenciando que o método por SEC é eficiente em monitorar o surgimento de agregados e produtos de degradação em estudos de degradação.

Tabela 1. Comparação da formação de espécies de alta massa molecular, baixa massa molecular e monômero em amostra controle e degradada.

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Referências:

Nota aplicação Jasco Inc – Monitoring of aggregates and degradation products by SEC in forced degradation studies of antibody drugs. Disponível em: https://www.jasco-global.com/solutions/monitoring-of-aggregates-and-degradation-products-by-sec-in-forced-degradation-studies-of-antibody-drugs/