Análise do efeito da temperatura na estrutura secundária de nanocorpos por FTIR

Nanocorpos, ou anticorpos de cadeia simples (VHH), são um tipo de anticorpo que apresentam fácil clonagem, pequeno tamanho e afinidade (que permite a penetração em tecidos densos), alta eficiência de expressão e estabilidade. Sua versatilidade estrutural e funcional faz com que estes anticorpos sejam considerados a nova geração de anticorpos para o diagnóstico e tratamento de doenças infecciosas.¹

A atividade dos anticorpos está relacionada à estrutura secundária destes compostos, sendo susceptíveis à variação da temperatura de manipulação e armazenamento. Logo, o controle da estabilidade estrutural desses compostos é essencial para se manter a qualidade do produto final. Os medicamentos à base de anticorpos são normalmente armazenados em refrigeradores e freezers, porém, podem sofrer desnaturação devido a oscilações na temperatura ou após repetido processo de congelamento/descongelamento.²

Um primeiro estudo utilizando FT/IR 6600 acoplado a um ATR PRO ONE com opcional de resfriamento fez a avaliação de uma amostra de anticorpo HVV em uma faixa de temperatura (ambiente até um pouco acima do congelamento) e a estrutura secundária desses compostos foi avaliada. Pelos dados analisados, observou-se alta estabilidade durante o resfriamento, uma vez que as estruturas secundárias não sofreram variações significativas.²

Em outro procedimento, três outras amostras foram congeladas até -25°C, descongeladas e medidas à temperatura ambiente. Este processo foi repetido por três vezes. A fim de obter maior sensibilidade, foi utilizado um ATR com prisma pentagonal (ATR PRO PENTA). Ao avaliar os dados, observou-se que as estruturas secundárias das três amostras de anticorpos VHH não mudaram significativamente ao longo do ciclo de congelamento/descongelamento.²

Dessa forma, podemos concluir que a utilização da técnica de espectroscopia no infravermelho não só é eficiente para avaliar a estabilidade de estruturas secundárias de medicamento à base de anticorpos frente a variações de temperatura, mas também para outros fins, como a reatividade com outros compostos.

Acesse a aplicação completa em:

Referências:
- Araujo, L.F.L., Ensaio para a produção de anticorpos de cadeia simples, do tipo VHH, como potencial ferramenta para a neutralização dos efeitos de fase aguda ocasionados por infecção do virus Zika (ZIKV), Dissertação de Mestrado, USP, 2020.
- Nota de aplicação Jasco Global. Analysis of the effects of low temperature on the secondary structure of VHH antibodies. Disponível em: https://www.jasco-global.com/solutions/analysis-of-the-effects-of-low-temperature-on-the-secondary-structure-of-vhh-antibodies/