Análise de Vitaminas Hidrossolúveis por HPLC

As vitaminas são indispensáveis para diversas funções bioquímicas no organismo, desempenhando um papel fundamental na manutenção da saúde. Elas se dividem em dois grupos principais: as lipossolúveis, que são armazenadas no tecido adiposo após serem absorvidas, e as hidrossolúveis, que são eliminadas mais rapidamente e, portanto, não são acumuladas de forma eficiente no corpo. Em certas situações, como em casos de doenças ativas, estresse, aumento da atividade física, qualidade alimentar inadequada ou deficiência na ingestão de nutrientes, a suplementação de vitaminas torna-se necessária. Para garantir a eficácia desses suplementos e das misturas de nutrição parenteral, é essencial avaliar sua estabilidade frente a diferentes condições ambientais, assegurando sua durabilidade e qualidade ao longo do tempo.

A Jasco do Brasil apresenta neste estudo um método validado de análise por HPLC, indicativo de estabilidade, para a quantificação simultânea das vitaminas C, B3 (niacina), B6 (piridoxina), B9 (ácido fólico) e B12 (cobalamina) em uma única corrida. As substâncias foram submetidas a condições de estresse, incluindo degradações alcalinas e ácidas sob aquecimento, degradação oxidativa e fotodegradação, com o objetivo de avaliar sua estabilidade.

A análise foi realizada em um sistema cromatográfico da Jasco, composto por uma bomba PU-2080 Plus, um amostrador automático AS-2055 Plus e um detector de arranjo de diodos MD-2018 Plus. A separação foi realizada utilizando uma coluna C18 (250 x 4,6 mm, 5 µm) e a fase móvel foi composta por uma mistura das fases A e B, empregadas em modo gradiente. A fase A consistiu em uma solução de água acidificada com 0,2% de ácido metafosfórico (m/v) e acetonitrila (98/2 v/v), ajustada para pH = 3,5 com solução de NaOH 10 M. A fase B foi composta por 100% de acetonitrila. Para detecção, foi utilizado o detector de arranjo de diodos (DAD).

O sistema cromatográfico da Jasco se mostrou altamente eficaz para a validação do método de análise das cinco vitaminas hidrossolúveis. A bomba PU-2080 Plus oferece uma excelente precisão e estabilidade no controle do fluxo, crucial para garantir a reprodutibilidade dos resultados durante a análise das vitaminas. O amostrador automático AS-2055 Plus, por sua vez, proporciona uma introdução eficiente e precisa das amostras, minimizando erros humanos e garantindo a consistência nos volumes injetados.

O detector de arranjo de diodos MD-2018 Plus é particularmente vantajoso para este tipo de análise, pois permite a detecção simultânea de múltiplas substâncias em diferentes comprimentos de onda, proporcionando alta sensibilidade e uma visão abrangente das vitaminas e seus produtos de degradação. Essa combinação de tecnologia, confiabilidade e alta performance foi fundamental para realizar a quantificação precisa das vitaminas C, B3, B6, B9 e B12, além de permitir a separação eficaz dos produtos de degradação das vitaminas originais, algo crucial para os estudos de estabilidade.

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Referência:

Yessaad, M., Bernard, L., Bourdeaux, D., Chennell, P., & Sautou, V. (2018). Development of a Stability Indicating Method for Simultaneous Analysis of Five Water-Soluble Vitamins by Liquid Chromatography. Pharmaceutical Technology in Hospital Pharmacy, 0(0). doi:10.1515/pthp-2018-0026