Análise dos enantiômeros de Varfarina por HPLC-CD

A Varfarina é um fármaco anticoagulante utilizado no tratamento e prevenção de tromboses e embolias. Este medicamento possui um centro quiral em sua estrutura, o que significa que ele existe na forma de dois enantiômeros: R e S (Figura 1). A Varfarina comercializada é uma mistura racêmica, ou seja, contém uma quantidade igual de ambos os enantiômeros. No entanto, a S-Varfarina é significativamente mais potente do que a R-Varfarina, sendo cerca de cinco vezes mais eficaz na inibição da vitamina K epóxido redutase, uma enzima chave na coagulação sanguínea. A diferença na atividade dos enantiômeros é importante, pois pode influenciar a dose e a resposta terapêutica do paciente.

Figura 1: Enantiômeros da Varfarina

A separação dos enantiômeros da Varfarina é de fundamental importância para a indústria farmacêutica, considerando o impacto direto que cada isômero pode ter na eficácia e segurança do medicamento. A técnica de HPLC é amplamente reconhecida e utilizada para separar compostos quirais de forma eficiente. No entanto, a identificação e diferenciação dos enantiômeros após a separação exige o uso de detectores especializados. Nesse cenário, os detectores de Dicroísmo Circular (CD) se destacam como ferramentas indispensáveis, pois medem a diferença de absorção da luz polarizada circularmente entre os enantiômeros, permitindo uma análise detalhada da configuração e da pureza enantiomérica.

Neste post, apresentamos um método eficaz para separar e identificar os enantiômeros da Varfarina utilizando um sistema de HPLC acoplado ao detector de CD modelo CD-4095 da Jasco. Esse sistema inovador permite a análise detalhada em tempo real, combinando alta sensibilidade e precisão na caracterização dos enantiômeros.

A Figura 2 mostra os cromatogramas de CD e absorção de R-(+)-Varfarina e S-(-)-Varfarina a 220 e 263 nm. A medição foi realizada usando o modo de Medição de Curso de Tempo e foi iniciada pelo sinal de disparo do injetor manual ou amostrador automático. A retenção de pico para R-(+)-Varfarina é observada em 7,61 minutos e a retenção de pico para S-(-)-Varfarina é de 9,78 minutos. Os sinais de CD e absorção são geralmente maiores em comprimentos de onda mais curtos, o que fornece maior sensibilidade. A área do pico de CD detectada a 220 nm é seis vezes maior do que o pico a 263 nm e a área do pico detectado a 220 nm é o dobro daquela a 263 nm. A razão de área de R-(+)-Varfarina e S-(-)-Varfarina é de 1:1.

A Jasco do Brasil é amplamente reconhecida como uma das empresas líderes em tecnologias de espectroscopia óptica, oferecendo soluções de ponta para diversas aplicações analíticas. Nossos módulos de detecção podem ser integrados a sistemas de HPLC, garantindo versatilidade e precisão nas análises. Entre os detectores disponíveis, destacam-se:

Detectores UV-Vis
Detectores PDA
Detectores de Índice de Refração (RI)
Detectores de Fluorescência
Detector Quiral (Rotação Ótica)
Detector de Dicroísmo Circular (CD)

Essa ampla gama de detectores posiciona a Jasco como referência em soluções analíticas, atendendo às demandas de setores como farmacêutico, químico, alimentício e biotecnológico, com tecnologia de ponta e alta confiabilidade.

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