Análise simultânea de vitaminas hidrossolúveis por HPLC

A determinação do prazo de validade de alimentos e suplementos alimentares depende da estabilidade de seus ingredientes ativos. Vitaminas hidrossolúveis, como as do complexo B e a vitamina C, são frequentemente fatores críticos nesse processo, devido à sua instabilidade natural frente a variações de pH, temperatura, luz e agentes oxidantes. Essa degradação impacta diretamente a qualidade nutricional e a conformidade regulatória dos produtos.

O Guia nº 16/2018, versão 3, enfatiza a importância de selecionar indicadores de estabilidade, realizar monitoramento periódico da perda de nutrientes e, quando necessário, ajustar a formulação por sobredosagem para garantir que os níveis declarados no rótulo sejam mantidos durante toda a vida útil do produto. Além disso, a forma física do suplemento e as condições de embalagem, como proteção contra luz, oxigênio e umidade, desempenham papel essencial na preservação das vitaminas.

Nesse contexto, a análise simultânea de múltiplas vitaminas hidrossolúveis por HPLC é uma ferramenta indispensável para o acompanhamento da estabilidade de multivitamínicos e alimentos funcionais. O estudo realizado pela Jasco demonstra um método confiável utilizando sistema LC-4000 com detector de matriz de diodos (PDA), capaz de quantificar vitaminas como tiamina, riboflavina, ácido ascórbico, ácido pantotênico, ácido fólico e cianocobalamina, mesmo em concentrações baixas e em matrizes complexas de suplementos.

Aplicação como ensaio de quantificação pós-estabilidade

Este método pode ser diretamente aplicado como ensaio de quantificação após testes de estabilidade de suplementos alimentares, seguindo as diretrizes da RDC 843/2024. Ao avaliar amostras submetidas a diferentes condições de armazenamento, é possível determinar com precisão a perda de vitaminas hidrossolúveis ao longo do tempo e confirmar se os níveis permanecem dentro dos limites declarados, garantindo conformidade regulatória e segurança nutricional.

Experimental

Resumo do método experimental

• Sistema LC-4000: bomba PU-4180, amostrador automático AS-4050, forno de coluna CO-4060, detector MD-4015.

• Coluna: Unifinepak C18 (4,6 mm × 150 mm, 5 µm)

• Eluentes: A – solução aquosa de fosfato de sódio 10 mmol/L (pH 2,8); B – acetonitrila

• Gradiente: 99/1 → 75/25 → 75/25 → 99/1 em 20 min

• Vazão: 1,0 mL/min | Temperatura: 40 ºC | Comprimentos de onda: 210 e 260 nm

• Amostra: comprimido multivitamínico triturado, pré-tratado com ácido metafosfórico, NaOH e tampão fosfato, centrifugado e filtrado

Resultados

As Figuras 1 e 2 mostram, respectivamente, os cromatogramas e os gráficos de contorno dos comprimidos de multivitamínicos, e a Tabela 1 apresenta os valores quantitativos. Os valores quantitativos confirmaram que os resultados foram, em geral, equivalentes aos valores efetivamente declarados no rótulo do produto.

Conclusão

O método apresentou alta reprodutibilidade, precisão e linearidade, com os resultados quantitativos correspondendo aos valores declarados nos rótulos. Seis vitaminas hidrossolúveis foram detectadas e quantificadas com confiança.

A combinação de diretrizes regulatórias sobre estabilidade de vitaminas com metodologias analíticas robustas, como a proposta pela Jasco, constitui uma abordagem completa para a avaliação da estabilidade de suplementos alimentares. Além disso, permite a implementação de ensaios de quantificação pós-estabilidade, garantindo a segurança nutricional e a conformidade com a RDC 843/2024.